ELISA试剂盒实验小技巧

1. 样本处理要规范
样本采集后应尽快处理，避免反复冻融。血清/血浆样本建议离心后分装保存，使用前充分混匀但避免剧烈振荡产生气泡。溶血或脂血样本可能干扰结果，应尽量避免。

2. 试剂提前平衡温度
所有试剂从冰箱取出后，需在室温（18–25°C）平衡至少30分钟再使用。温度不均匀是导致孔间差异大的常见原因之一。

3. 加样操作要一致
加样时动作要轻柔，避免产生气泡；每块板的加样时间间隔尽量保持一致，以确保各孔的孵育时间相同。建议使用多道移液器提高效率和一致性。

4. 洗板要彻底
洗涤步骤是减少背景噪音的关键。每次洗涤后需将板倒置在吸水纸上拍干，确保残液充分去除。洗涤次数不足是假阳性的常见原因。

5. 避光孵育显色
加入底物后需避光孵育，时间严格按说明书执行。显色时间过长会导致高值样本超出线性范围，影响定量准确性。

6. 及时读板
加入终止液后应在30分钟内完成酶标仪读数，避免颜色继续变化影响结果。