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双抗体夹心法与竞争法的区别

发表时间:2025-04-24

双抗体夹心法是一种基于抗原 - 抗体特异性结合反应的检测方法。其原理是先将已知的抗原特异性抗体(捕获抗体)固定在微孔板上,当加入含有待测抗原的样品时,抗原会与捕获抗体结合。然后再加入另一种针对同一抗原不同表位的标记抗体(检测抗体),通过标记物的信号来检测结合在捕获抗体上的抗原。这种方法适用于检测具有多个表位的大分子抗原,能够特异性地捕获和检测目标抗原,具有较高的灵敏度和准确性。例如在检测血清中的某些蛋白质含量时,常采用双抗体夹心法。

而竞争法则是基于竞争性结合的原理。先将待测抗原或与之类似的竞争抗原与标记抗体预先混合,然后再加入到包被有固定抗原的微孔板中。此时,待测抗原和固定抗原会竞争与标记抗体的结合位点,通过测量标记抗体的结合量来推算出待测抗原的含量。竞争法通常用于检测小分子抗原或半抗原,因为它们一般只有一个结合表位,难以用双抗体夹心法检测。比如在检测药物残留、某些激素含量等方面,竞争法应用较为广泛。

在实际应用中,双抗体夹心法由于其对目标抗原的特异性结合和准确的信号放大,结果相对更为可靠,但对抗原的纯度和性质要求较高。竞争法的优点在于对小分子抗原的检测效果较好,但操作过程相对复杂,且容易受到非特异性结合的影响。

此外,两者在结果解读上也有所不同。双抗体夹心法通常是抗原含量与检测信号呈正相关,而竞争法中抗原含量与标记抗体的结合量呈负相关。

双抗体夹心法和竞争法各有特点,在不同的研究和检测需求中发挥着重要作用,科研人员和检测工作者需要根据具体的实验目的和样品性质选择合适的方法。

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